QC lab - vědomostní databáze

Zde najdete tipy k přesnému pipetování

Automatické pipety:


Z obrázku je patrné, jaký způsob pipetování je správný a nejpřesnější. Pipetu je nezbytné držet kolmo k hladině pipetované kapaliny a špičku ponořit maximálně jeden centimetr pod hladinu.

Správný postup klasického pipetování automatickými pipetami:

1. Příprava pipety

Zkontroluj, zda je pipeta kalibrovaná a čistá. Nastav požadovaný objem na digitálním displeji nebo otočném kroužku. Použij správný typ špičky (kompatibilní s pipetou, sterilní pokud je potřeba).

2. Nasazení špičky

Jemně zatlač pipetu do špičky, ne silou (aby nedošlo k deformaci). Ujisti se, že špička těsně sedí.

3. Nabrání vzorku

Přednabrání:
Stiskni píst na první doraz (ne druhý!).
Ponor špičky:
Do kapaliny ponoř max. 2–3 mm (hlubší ponor = vyšší chyba).
Nasátí:
Pomalu uvolňuj píst, neprudce (aby nevznikly bubliny).
Předvyrovnání:
Pokud je kapalina viskózní, pipetu několikrát propláchni vzorkem.

4. Výdej vzorku

Přilož špičku ke stěně nádoby pod úhlem cca 45°. Stiskni píst na první doraz → kapalina ven. Poté druhý doraz → odstranění zbytku. Vytáhni pipetu až po uvolnění pístu (aby nevznikl podtlak).

5. Po použití

Špičku vyhoď do odpadu (nepoužívej opakovaně, pokud není validováno). Pipetu vracej do stojanu, nikdy volně na stole.

Tipy pro přesnost

Pipetuj pomalu a plynule. Drž pipetu vertikálně při nasávání. Teplota vzorku a pipety by měla být stejná (minimalizace expanze). U malých objemů ( pod 10 µL) používej pozitivní vytěsňovací pipety nebo reverse pipetting.